Статьи

Микрометод

Комплемент составляет примерно 10% глобулинов сыворотки человека. Для его определения в сыворотке используется способность вызывать иммунный гемолиз, обычно бараньих эритроцитов. Содержание комплемента выражается в количестве сыворотки, вызывающей гемолиз 50% сенсибилизированных антителами-гемолизинами эритроцитов.

Результаты выражаются в гемолитических единицах в мл. Однако при обследовании спортсменов, что приходится зачастую делать в экспедиционных условиях, более доступен учет комплемента по полному гемолизу эритроцитов. При этом активность комплемента, его титр выражаются обычно наименьшим количеством испытуемой сыворотки, вызывающей такой гемолиз.

Имеется ряд модификаций постановки реакции. Наиболее просто использовать микрометод, минимальные количества испытуемой сыворотки — 0,01 — 0,02 — 0,04 — 0,06 — 0,08 мл и т.д. наливают в пробирки, куда добавляют физиологический раствор до общего объема 0,2 мл.

Затем в каждую пробирку следует добавить еще по 0,4 мл физиологического раствора и 0,4 мл гемолитической системы (3% бараньих эритроцитов пополам с гемолитической сывороткой в тройном титре).

Результат реакции учитывают после 30-минутной инкубации в термостате при 37°С. За титр комплемента принимается минимальное количество сыворотки, вызывающее полный гемолиз. Содержание комплемента в сыворотках здоровых людей составляет обычно 0,04 — 0,06 мл.